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Post by catterbox on Aug 2, 2023 4:29:13 GMT -1
过STR鉴定细胞。对于细胞转染, NSun2的混合物根据制造商的说明,用 Lipofectamine RNAiMAX 试剂(Thermo,13778-150)转染和对照 siRNA。当 siRNA 和质粒共转染时,按照制造商指南的规定使用 Lipofectamine 3000 试剂(Thermo,L3000015)。对于 NS-KO 小鼠来源的小 RNA 的转染,使用 50-100 nt RNA 作为对照,并采样 14-50 nt RNA。转染时,这些 的 亚洲手机号码列表比例混合,标记。使用Lipofectamine 3000试剂作为转染试剂。对于合成 tsRNA 的转染,将这些 tsRNA 以等比例混合,并将混合物与 的比例混合。对于六孔板,使用 80 pmol RNA 进行转染。使用Lipofectamine 3000作为转染试剂。tsRNA转染方法请参考siRNA转染方法。 增殖试验 将 培养的 HL-7702 细胞暴露于 10 μM H 2 O 2细胞用siRNA或质粒转染24小时(或10μg/mL CHX转染1小时)后,。然后将 细胞与 50 μM 5-乙炔基脱氧尿苷 (EdU) 一起孵育 3 小时,并用 PBS 洗涤一次。将细胞用 4% PFA 的 PBS 溶液固定 0.5 小时。用 2 mg/mL 甘氨酸中和多聚甲醛 5 分钟。用 PBS 洗涤细胞 5 分钟,然后将 0.5% Triton X-100(PBS 溶液)添加到
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